Инфекционная серология. Для чего делают серологический анализ крови? Противопоказания для проведения

Инфекционные болезни инициируют выработку в крови болеющего человека соответствующих антител. Так работает иммунная защита организма.

Определение наличия антител к конкретному вирусу или бактерии дает возможность узнать о наступлении заболевания до появления его основных симптомов. Сегодня серологическое и дают наиболее полную картину. Поэтому мы и поговорим в данной статье об анализе на серологическое исследование.

Что такое серологические исследования

Методы изучения биологических материалов людей и животных, способные выявлять в них антитела или антигены, которые вырабатывает организм в виде защитной реакции в борьбе с инфекциями, называют серологические исследования. Такие методы применяют для определения возбудителя инфекции, а также с целью:

определения группы крови,
изучения иммунитета через определение уровня его гуморального звена,
определения тканевых антигенов.

Кому его назначают

Зачем его делать

Метод ценится специалистами как способ сделать качественную диагностику заболевания.

Если больной находится в стадии заболевания, то повторные исследования рекомендуется проводить с интервалом примерно – неделя, чтобы наблюдать за эффективностью применяемого лечения.
Часто серологические исследования используют, чтобы определить, какой возбудитель вызвал болезнь уже после того, как пациент ее перенес.

Виды процедуры

Методы серологических исследований используют в своей основе различные реакции:

Реакция нейтрализации полагается на свойстве антител иммунной сыворотки действовать как нейтрализующее средство на токсины или сами микроорганизмы, предупреждая их повреждающее действие.
Реакция агглютинации , которая, в свою очередь, подразделяется на такие подвиды:
- прямые реакции – их применяют при исследовании сыворотки крови на присутствие антител. В изучаемый состав вбрасывают убитые микробы и, если выпадает осадок в виде хлопьев, то значит, что на этот вид микробов реакция положительная;
- реакция непрямой гемагглютинации производится введением в сыворотку крови эритроцитов, на которых адсорбированы антигены; эти агенты входят во взаимодействие с такого же рода антигенами, присутствующими в сыворотке крови, в результате этого выпадает фестончатый осадок.
Реакция с участием комплемента применяют для выявления инфекционных болезней. Метод реализуется через активацию комплемента и наблюдением за происходящими реакциями в исследуемой среде.
Реакция преципитации осуществляется наслоением раствора антигена на жидкую среду – иммунную сыворотку. Антиген для этого метода применяют растворимый. Реакция заключается в том, что комплекс антиген-антитело претерпевает осаждение; полученный осадок называют преципитатом.
Реакция с использованием меченых антигенов и антител основана на том, что микробы или антигены тканей, обработанные определенным образом, получают способность под действием ультрафиолетовых лучей излучать свет. Метод используют не только при диагностировании антигенов, но и для определения лекарственных веществ, ферментов, гормонов.

Противопоказания для проведения

В связи с тем, что метод заключается в изучении биологического материала пациента, он не может воздействовать негативно на человека. Поэтому противопоказаний к применению не имеется.

Исследование полностью безопасно.

Как проводится серологическое исследование, расскажем ниже.

Показания для проведения

Метод применяют для определения возбудителя инфекции, в том числе при таких заболеваниях:

ВИЧ-инфекция,
токсоплазмоз,
инфекционные болезни, полученные половым путем;
дифтерия,
наличие ;
бруцеллез,
стафилококковые инфекции,
гепатит.

Также метод используют для выявления таких заболеваний:

описторхоз,
амебиаз,
цистицеркоз,
лямблиоз,
пневмония.

Подготовка к процедуре

Особых приготовлений к процедуре не требуется. Следует соблюдать одно условие: забор крови делается натощак.

Алгоритм забора (взятия) крови (материала) на серологическое исследование описан ниже.

Проведение анализа

Забор крови делают из локтевой вены. Для того чтобы исследование получилось, кровь набирают не шприцом, а самотеком. В вену вводят иглу без шприца и собирают в пробирку до 5 мл крови.

Во время процедуры пациент испытывает небольшой дискомфорт во время введения иглы в вену. Последующие действия совсем не вызывают беспокойства.

Расшифровка результатов серологического исследования крови описана ниже.

Расшифровка результатов

Полученные результаты следует рассматривать совместно с клинической картиной болезни, проверкой предполагаемого диагноза с использованием нескольких тестов. Это связано с тем, что исследования имеют специфичный характер и иногда не обладают абсолютной чувствительностью к инфекционным заболеваниям.

Цена на комплексное серологическое исследование крови описана ниже.

Средняя стоимость процедуры

Какая цена процедуры будет зависеть от вида исследования. Она состоит из стоимости произведения анализа и стоимости антител к определенному возбудителю болезни. Средняя стоимость процедуры в пределах 700 руб.

Серологические реакции описаны в видео ниже:

В наше время есть достаточно много анализов, которые нам по жизни приходится сдавать. В этой статье рассмотрим такой вида анализа, как анализ крови на серологию. Этот анализ проводится для того, чтобы дать ответ на вопрос есть ли у человека какие либо инфекционные заболевания и все ли у него в порядке со здоровьем. Инфекционные заболевания также могут передаваться половый путем, и именно такие заболевания может определить серологический метод исследования крови .

Что такое серологический анализ крови

Серологический анализ крови - это тот анализ, который может показывать наличие инфекционных, вирусных и микробных заболеваний.

В основном такой анализ построен на определения чужеродных тел, а именно недоброкачественных бактерий, инфекций и прочих организмов, которые могут вызвать у человека заболевания.

Наверное, многие знают о том, что когда в организм человека попадает чужеродное тело, бактерии, или прочая инфекция, то организм активно начинает выделать конкретные антитела, которые впоследствии выделяют белок. Именно этот белок способствует борьбе с чужеродными микроорганизмами. Но иногда нашему организму нужна помощь, так как белок, который борется за излечение и очищение организма, а серологический анализ крови позволяет медикам определить какое заболевание нужно лечить и как подобрать эффективный метод лечения.

Как проводится серологический анализ крови

Анализ крови серологический проводится при помощи двух способов.
Первый способ включает в себя процесс введения сыворотки в саму кровь человека, для того, чтобы впоследствии произошла реакция антител, и узнать, сколько в организме есть патологических клеток.

Такой способ предусмотрен для определения, самого заболевания, чем оно грозит и для того чтобы выбрать подходящую тактику лечения.

Второй метод предпочитает в себе процесс введения конкретных антител из крови человека в сыворотку. Такой способ используется только в отдельных случаях, когда заболевание уже определено, но специалистам из сферы медицины просто необходимо узнать количество антител.

Какие особенности стоит учитывать при сдаче серологического анализа крови

Дело в том, что такие продукты могут значительно влиять на состав крови, все, что мы едим, может давать осадок в нашу кровь и именно из-за этого нужно придерживаться 3-х дневной диеты, для того, чтобы организм немного очистился перед анализом.

Ни в коем случае нельзя сдавать анализ крови на серологию, когда в ее составе присутствует алкоголь, так вы можете не только испортить диагноз, но и также заработать себе плохую репутацию.
Сдавать кровь нужно натощак, так как именно в то время как Ваш желудок будет находиться пустым, в крови будут видны только лейкоциты, эритроциты, тромбоциты, белок и антитела. Таким образом, анализ покажет более точный ответ.
Также стоит все-таки сдать биологический материал (кровь) для того, чтобы специалисты из сферы медицины могли без особых сложностей установить правильный диагноз, увидеть, как взаимодействуют антитела с антигенами, и в конечном итоге призначить правильное и эффективно лечение.
Для курильщиков также стоит запомнить, что за 2 дня до сдачи крови нужно сдержаться от табака, так как он также виден в крови.
Психически-эмоциональное состояние также очень важно, так как это тоже фактор, который влияет на самочувствие и состояние человека. При стрессовых ситуациях анализ крови не будет, скорее всего, неудовлетворительным.

Норма и отклонения в анализе

Когда специалисты из сферы медицины проводят такие анализы, то результат их очень важен, так как именно он может показать, как организм реагирует на сыворотку.

Если у человека в крови вообще нет антител, то это очень хороший результат того, что у него нет никакого заболевания. Но такое случается крайне редко, так как наш организм, это механизм, который постоянно с чем-то борется, то с микробами, то с вирусами, ведь Мы каждый день ходим по улицам, где в воздухе уже есть микробы и бактерии.

Обычно такой анализ крови проводят 2 раза для того, чтобы переубедиться в том или ином диагнозе.
При тех обстоятельствах, когда человека обнаруживают большое количество антител, то это означает, что в организме человека присутствует вирус или инфекция. При таких обстоятельствах лечение и обследование назначают незамедлительно.

Как расшифровать анализ крови

Человек, который получил справку о результате такого анализа, может просто ничего не понять, так как там будет достаточно много терминологии, которая впоследствии может быть непонятна обычному человеку, но лечащий врач, который увидит такие выводы и результаты с точностью сможет сказать результат и расшифорвку анализа.

Если все же что-то не так, что врач обязательно должен сообщить то этому пациенту, так как это его работа.

Как было сказано выше, такой анализ в основном проводится для определения количества антител, нормированном варианте их количество должно быть равно нулю.

Итог

Чаще всего люди думают, что сдача крови это очень страшно и больно, но это не так. Все-таки сдача крови нам каждому необходима для того, чтобы человек знал, что есть у него в крови и в организме есть ли какие-то заболевания. Важно помнить, что любое ухудшение эмоционального состояния, стресс или боязнь чего-то может вызвать у Вас бурю эмоций, что потом будет слаживаться на самом анализе непосредственно. Главное, это не волноваться все-таки это делается для здоровья.

Серологический анализ крови – один из лабораторных методов исследования, проводимых для оперативного выявления вирусов, инфекций и микробов в человеческом организме.

Серологический анализ позволяет выявить заболевания, связанные с понижением иммунитета, а также такие опасные для жизни недуги, как ВИЧ.

Часто серологический способ обследования крови применяют с целью определения уровня специфических белков, а также при необходимости узнать группу крови больного.

Серология – научно-исследовательская деятельность, изучает плазму человеческой крови и ее иммунобиологические качества.

В сфере медицины серологией именуют определенный раздел иммунологии, где все внимание уделяется исследованию реакции антитела и антигена в плазме крови пациента.

При этом серологическую реакцию разделяют по принципу действия на два вида:

прямое взаимодействие (двухкомпонентная) – предполагается реакция агглютинации; пассивная гемагглютинация и преципитация;
косвенная (трехкомпонентная) – предполагается РТГА (реакция гемагглютинации), основывается на подавлении антигенов антителами; реакция нейтрализации – способность антител связывать микровозбудителя инфекции.

Как уже упоминалось выше, серологический анализ крови дает возможность диагностировать вирусно-инфекционные заболевания и определять стадию текущего процесса воспаления, позволяет оценить степень взаимного действия антител плазмы крови и антигена.

Данный метод исследования применяется в следующих случаях:

при необходимости установить число антител, которые воздействуют на провокатора заболевания. В ходе проведения анализа в плазму крови добавляют известный патогенный агент, затем оценивают результат реакции;
обратное действие – развитие инфекции обнаруживают путем добавления в плазму антител, за счет чего удается выявить находящие в ней антигены и их соответствие конкретному патогенному микроорганизму;
при необходимости установить группу крови.

Серологический способ обследования крови является незаменимым при подозрении на развитие инфекции в половых путях, при выявлении разного типа венерических заболеваний.

Результат выполненного анализа позволяет получить информацию о наличии в крови антител к определенной группе патогенных микроорганизмов.

Это заболевания печени, герпес, краснуха, вирус, поражающий клетки иммунной системы человека. В зависимости от результатов проведенного анализа лечащий врач делает заключение и назначает пациенту либо дополнительные исследования, либо курс лечебной терапии.

Кровь для проведения серологического обследования берется из локтевой вены пациента. Специальной подготовки со стороны пациента процедура не требует, разве что сдать анализ необходимо будет натощак.

За сутки до сдачи анализа из рациона пациента исключают фрукты и овощи, обладающие окрашивающим эффектом.

Повторное серологическое обследование крови может понадобиться при необходимости подтвердить результаты исследования.

Особенности проведения анализа на ВИЧ, гепатит и сифилис

Подозревая присутствие возбудителя сифилиса в крови, определяют антитела, которые отвечают за реакцию на попадание в организм патогенного спиралевидного микроорганизма – Treponema pallidum.

Для оценки состояния крови применяется плазма. Подтверждение того, что организм действительно был инфицирован, удается получить только через 1,5 – 2 месяца с момента атаки.

В конкретных ситуациях, например, у женщин в период протекания беременности, серологический метод исследования плазмы на сифилис может иметь положительный, но ложный результат.

Подобные моменты учитываются врачом при диагностировании заболевания.

Что касается сдачи крови для анализа на гепатит, то поводом для этого могут послужить следующие ситуации:

непонятная периодическая потеря сил;
отсутствие аппетита, чувство тошноты;
неестественный цвет мочи и кала;
светло-желтый цвет кожи и белков глаз.

Диагностирование разных типов гепатитов необходимо выполнять в период беременности и в ходе профессионального медосмотра.

Своевременно проведенное серологическое исследование позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие заболевания, а при утвердительном результате определить стадию его развития.

Проверка людей на ВИЧ выполняется с целью выявления вируса, убивающего человеческий иммунитет.

Если в исследуемой плазме выявляются вирусы или антитела, то проведенный тест является положительным.

Но проведенный тест на вирус иммунодефицита при любых результатах не может свидетельствовать о том, что человек действительно является или не является носителем СПИДа.

Объясняется данный факт тем, что присутствие ВИЧ не всегда расценивается как норматив уже имеющейся болезни.

Если после возможного инфицирования прошло менее тридцати дней, то расшифровка результатов не может быть достоверной. В связи с этим лечащий врач назначает пациенту повторное обследование.

Объяснения показателей серологического анализа

Проведение серологического анализа крови назначают пациентам, если по каким-либо причинам невозможно выполнить дифференциальное диагностирование инфекционных заболеваний.

С помощью серологического анализа плазмы крови специалисты способны определить тип провокатора инфекции и диагностировать заболевание.

Дополнительное преимущество использования серологической методики обследования заключается в возможности подобрать для пациента оптимальный вариант лечебной терапии.

Данный факт остается актуальным, так как практически все возбудители инфекционных заболеваний имеют разную чувствительность к воздействию антибиотиков и прочих лекарств.

Расшифровка результатов серологического анализа крови позволяет увидеть, какому заболеванию подвергся человек в результате попадания инфекции в организм.

Кроме того, расшифровка показателей серологического исследования дает возможность опытному врачу полноценно исследовать обнаруженную патологию.

При отсутствии в крови антител развитие инфекции в организме не происходит, соответственно, расшифровка результата анализа показывает, что тест является положительным и тем самым отрицает присутствие у человека опасной скрытой инфекции.

Несмотря на это, окончательный диагноз ставится лишь после повторного анализа.

Как правило, при подозрении на наличие в организме какого-либо инфекционного заболевания серологическое исследование выступает в качестве достоверного доказательства присутствия у человека опасной для жизни патологии.

Поэтому процесс исследования в обязательном порядке должен быть повторен. Специалист определяет присутствие в организме инфекционных микровозбудителей, затем по объему антител устанавливают стадию развития воспаления.

Если расшифровка результата проведенного серологического анализа показывает содержание антител в крови «0», то стоит отметить, что данный показатель считается нормой.

Зато в случае малейшего повышения уровня антител в крови можно будет говорить о начальной стадии развития патологии в организме человека.

Но опять же, для получения более достоверных данных может понадобиться проведение повторного анализа или дополнительных обследований.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (лат. serum сыворотка + греч. logos учение) - методы иммунологии, изучающие специфические свойства крови человека или животных с целью выявления антигенов или антител с помощью серологических реакций.

Начало С. и. положено в конце прошлого столетия, после того как было установлено, что соединение антигена с антителом (см. Антиген - антитело реакция) сопровождается рядом доступных визуальному наблюдению феноменов - агглютинацией (см.), преципитацией (см.) или лизисом. Появилась возможность специфического распознавания антигенов (см.) или антител (см.), если один из этих компонентов известен.

В 1897 г. Ф. Видаль сообщил, что сыворотка крови больных брюшным тифом избирательно агглютинирует брюшнотифозные бактерии и поэтому эта реакция (см. Видаля реакция) может быть применена для лаб. диагностики брюшного тифа. В том же году было показано, что фильтраты культур чумных, брюшнотифозных и холерных бактерий при соединении с соответствующими иммунными сыворотками образуют хлопья, или преципитат.

Реакция преципитации оказалась пригодной для обнаружения любых белковых антигенов. В 1900-1901 гг. К. Ландштейнер нашел, что в эритроцитах людей имеются два различных антигена (А и В), а в сыворотках крови два агглютинина (а и Р), что способствовало применению реакции гемагглютинации для определения групп крови (см.).

Реакция агглютинации для определения группы крови и резус-фактора применяется в акушерской практике, при гемотрансфузиях и трансплантации тканей. Антитела против резус-фактора (см.) представляют собой неполные антитела, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса (см. Кумбса реакция), основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против IgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против IgG, и происходит агглютинация эритроцитов. Для диагностики гемолитической анемии используют прямую реакцию Кумбса, В организме таких больных эритроциты соединяются с циркулирующими в крови антителами против резус-фактора. Чтобы их выявить, к эритроцитам, взятым у больного, добавляют антитела против IgG. Появление агглютинации эритроцитов подтверждает диагноз болезни.

Реакция торможения гемагглютинации - РТГА (см. Гемагглютинация) - основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сывороткой гемагглютинации эритроцитов вирусами. Феномен вирусной гемагглютинации не является серол. реакцией и происходит в результате соединения вируса с рецепторами эритроцитов, однако РТГА представляет собой серологическую реакцию, используемую для выявления и титрования противовирусных антител. РТГА - основной метод серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители к-рых обладают гемагглютинирующими свойствами.

Реакция пассивной, или непрямой, гемагглютинаций, В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические хчатериалы (напр., частицы латекса), на поверхности к-рых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела (см. Бойдена реакция). Агглютинация их происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами (см.) и используют для выявления антигенов:

Реакция пассивной гемагглютинации применяется для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.). Реакция пассивной гемагглютинации по чувствительности не уступает методу выделения вируса при ареновирусных болезнях (см.), в частности при лимфоцитарном хориоменингите. Вирусный антиген лимфоцитарного хориоменингита выявляется у вирусоносителей (домовых мышей) в реакции пассивной гемагглютинации с суспензиями извлеченных органов, разведенными в десятки тысяч раз. При сальмонеллезе в реакции пассивной гемагглютинации определяются бактерии при концентрации до нескольких сотен микробных тел в 1 г фекалий, дизентерийные бактерии в пищевых продуктах выявляются при содержании в 1 г материала не менее 500 микробных тел.

Реакция пассивной гемагглютинации используется в диагностике и профилактике вирусного гепатита В. В Советском Союзе для выявления HBs-антигена (см. Австралийский антиген) в крови больных с острым гепатитом В производится диагностикум, представляющий собой эритроциты кур, сенсибилизированные козьим иммуноглобулином против HBs-антигена. Каплю диагностикума соединяют с равным объемом сыворотки крови обследуемых людей, и, если в ней присутствует HBs-антиген, происходит агглютинация. Реакция способна уловить до 1,5 нг/мл HBs-антигена. Для обнаружения HBs-антител используют эритроциты с сорбированным на них HBs-антигеном, выделенным из крови больных. Реакцию пассивной гемагглютинации применяют также для выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, напр, пенициллину или инсулину. В этом случае эритроциты 0 группы крови человека сенсибилизируют лекарственным веществом и затем используют для выявления к нему агглютининов в сыворотке крови больного.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для выявления гонадотропного гормона в моче с целью установления беременности (см. Хорионический гонадотропин). Для этого стандартная сыворотка к этому гормону инкубируется с исследуемой мочой. При последующем добавлении эритроцитов с сорбированным на них гормоном агглютинация не наступает (положительный ответ), т. к. содержащийся в моче гормон нейтрализовал агглютинирующие антитела.

Реакции, основанные на феномене преципитации

Их используют для определения самых разнообразных антигенов и антител. Простейшим примером качественной реакции является образование непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело в пробирке. Широко применяются различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлектрофорез), к-рые носят одновременно качественный и количественный характер (см. Иммунодиффузия , Иммуноэлектрофорез).

Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5-3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку - иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат. При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини) иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр к-рых пропорционален концентрации антигена. Модификацию этой реакции используют в диагностике гриппа для распознавания IgM- и IgG-антител (см. Иммуноглобулины). В агар вносят гриппозный антиген, а в лунки сыворотки крови. Затем пластины обрабатывают иммунными сыворотками против IgM- или IgG-антител, что способствует выявлению реакции соответствующих антител с антигенами. Метод позволяет одновременно определять титры антител и принадлежность их к определенному классу иммуноглобулинов.

Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против IgG-антител, к-рая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген - антитело обнаруживают методом авторадиографии (см.).

Реакции с участием комплемента. Реакции с участием комплемента (см.) основаны на способности субкомпонента комплемента Cl(Clq) и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

Реакция связывания комплемента позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген - антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с бараньими эритроцитами (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов не наблюдается гемолиза (см. Реакция связывания комплемента). Реакция широко применяется для серодиагностики висцерального сифилиса (см. Вассермана реакция) и вирусных инфекций (см. Вирусологические исследования).

Цитолиз. Антитела против клеточных структур могут при участии комплемента растворять клетки, несущие эти структуры. Лизис эритроцитов легко оценивать по степени и интенсивности освобождения гемоглобина. Лизис нуклеарных клеток оценивают путем подсчета процента мертвых клеток, к-рые не окрашиваются метиленовым синим. Часто также используют радиоактивный хром, к-рый предварительно химически связывают с клетками. Число разрушенных клеток определяют по количеству несвязанного хрома, освобождающегося при лизисе клеток.

Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель, добавив туда комплемент; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител будет образовываться зона гемолиза. Радиус зоны гемолиза прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, напр, гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакция радиального гемолиза в геле нашла применение в диагностике вирусных инфекций благодаря простоте постановки, нечувствительности к сывороточным ингибиторам, возможности титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (C3). Если к антигену (бактерии, вирусы и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген - антитело, покрытый C3-компонентом комплемента. При смешивании с тромбоцитами благодаря C3-компоненту комплемента комплекс антиген - антитело осядет на клетках и вызовет их агглютинацию (см. Иммунное прилипание). Эта реакция применяется для определения антигенов системы HLA (см. Иммунитет трансплантационный) и при изучении ряда вирусных -инфекций (клещевой энцефалит, лихорадка денге), к-рые сопровождаются иммунопатол. процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать нек-рые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, напр, активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эта реакция используется для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биол. эффекту, так, напр., титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки (см. Токсин - антитоксин реакция). Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, предотвращает их гибель. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры патогенность вирусов нейтрализуется.

Реакции с использованием химических и физических меток

Иммунофлюоресценция, разработанная Кунсом (А. Н. Coons) в 1942 г., заключается в использовании для серол. реакций меченных флюорохромом сывороток (см. Иммунофлюоресценция). Меченная флюорохромом сыворотка образует с антигеном комплекс антиген - антитело, к-рый становится доступным наблюдению под микроскопом в ультрафиолетовых лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате в протоплазме нервных клеток наблюдаются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген - антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против IgG-антител и используемый для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалип, лихорадки Ласса. В лаборатории должен храниться при г°-20° запас препаратов антигенсодержащих клеток, напр, выращенные на кусочках тонкого стекла и зараженные вирусом клетки VERO или куриные фибробласты, зафиксированные ацетоном. На препараты наслаивают исследуемую сыворотку крови, помещают препарат в термостат при f 37° для образования иммунных комплексов, а затем после отмывания несвязавшихся реагентов выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против IgM-или IgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию IgM-антител.

В энзим - иммунологическом методе применяют антитела, конъюгированные с ферментами, гл. обр. пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченой сыворотки с антигеном, добавляют субстрат, разлагающийся присоединенным к сыворотке ферментом с появлением окрашивания в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, энзимиммунологический метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

Наиболее популярной разновидностью энзим-иммунологического метода является иммуносорбция. На твердом носителе, к-рым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченную ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченной ферментом антимикробной сывороткой.

Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлся меченный изотопом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода. Радиоиммунологический метод - наиболее чувствительный метод определения антигенов и антител, используемый для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов.

Сравнительная характеристика и использование методов серологических исследований в медицинской практике

Методы С. и. непрерывно совершенствуются в направлении повышения чувствительности и универсальности использования. Изначально серол. диагностика основывалась на выявлении антител. С появлением в середине 20 в. реакций иммунофлюоресценции и пассивной гемагглютинации, обладающих большей чувствительностью, появилась возможность обнаруживать не только антитела, но и антиген непосредственно в материале от больных. Энзим-иммунологический и радиоиммунологический методы, по чувствительности на 2-3 порядка превышающие иммунофлюоресценцию и пассивную гемагглютинацию, приближаются к методам биол. обнаружения бактерий и вирусов. Область их применения для обнаружения как антигенов, так и антител теоретически не ограничена.

Серодиагностика инф. болезней базируется на появлении антител к выделенному или предполагаемому возбудителю независимо от того, был ли обнаружен возбудитель в острой стадии болезни. Исследуют пары сывороток крови, взятых в начале болезни и 2-3 нед. спустя. Прирост антител во второй сыворотке крови не менее чем в 4 раза по сравнению с первой является диагностически значимым. Имеет также значение, каким классом иммуноглобулинов представлены антитела. IgM-антитела обнаруживают в конце острого периода болезни и в ранней стадии реконвалесценции. IgG-антитела появляются в более поздние сроки реконвалесценции и циркулируют долго. Если у женщины в первом триместре беременности обнаруживают IgM-антитела к вирусу краснухи, то это служит основанием для прерывания беременности, т. к. в этот период плод особенно чувствителен к вирусу. При разных инф. болезнях избирательно используют наиболее специфические и удобные в исполнении методы.

С. и. широко применяют в эпидемиологии. Систематический сбор и исследование образцов крови различных групп населения позволяют уяснить контакты населения с источником возбудителей инф. болезней. Изучение уровня коллективного иммунитета позволяет выявлять группы повышенного риска и планировать прививочные мероприятия, изучать географическое распространение инфекций. С. и. различных возрастных групп населения позволили, напр., ретроспективно выявить циркуляцию разных вариантов вируса гриппа в определенные периоды времени.

С. и. имеют большое значение в изучении наследственных болезней (см.) и аутоиммунных болезней, сопровождающихся появлением ткане- и органоспецифических антител, разрушающих соответствующие клетки-мишени, а также в онкологии для обнаружения опухолевых антигенов. Так, иммунодиагностика рака печени основана на определении в сыворотке крови больных альфа-фетопротеина и других эмбриональных антигенов методом иммунодиффузии и радиоиммунологическим методом.

Значительный прогресс науки в изучении тонкой антигенной структуры клеточных антигенов, антигенов бактерий и вирусов достигается благодаря применению в серол. реакциях моноклональных антител, к-рые можно получать к отдельным детерминантам антигена.

Библиография: Методы исследований в иммунологии, под ред. И. Лефковитса и Б. Перниса, пер. с англ., М., 1981; Руководство по иммунологии, под ред. О. Е. Вязова и Ш. X. Ходжаева, М., 1973; Руководство по клинической лабораторной диагностике, под ред. В. В. Меньшикова, М., 1982; Immunology, ed. by J.-F. Bach, N. Y., 1978.

С. Я. Гайдамович.

Серологический анализ крови – это лабораторное исследование, применяемое в целях диагностики инфекционных заболеваний и определения стадии инфекционного процесса.

Для анализа используется сыворотка крови, полученная при удалении из плазмы крови фиброгена - компонента, отвечающего за свертывание крови. Подобная технология и дала методу название: термин «серология» образован от латинского слова serum (сыворотка) и греческого logos (учение).

Серологический анализ основан на том, что любая инфекция, любой чужеродный агент, попадая в организм, вызывает ответную реакцию нашей защитной системы. Обороняясь, иммунная система вырабатывает антитела, предназначенные для уничтожения антигенов - возбудителей инфекции и других чужеродных агентов. Каждому антигену соответствуют свои антитела, по их присутствию в крови можно сделать вывод о разновидности инфекции и её активности в организме.

В процессе исследования серологические реакции используются в двух направлениях:

для подтверждения диагноза в сыворотку добавляется антиген, соответствующий данному заболеванию, а ответная реакция показывает наличие (или отсутствие) антител.
если необходимо определить возбудителя инфекции (антиген не известен), в сыворотку добавляются антитела. Вид антител, вызвавших реакцию, укажет родовую и видовую принадлежность присутствующих микроорганизмов.

Когда назначается серологический анализ крови?

Серологический анализ крови назначается в следующих целях:

для диагностики заболевания, если при установлении диагноза требуется подтверждение наличия возбудителя заболевания;
в целях назначения курса лечения, так как различные возбудители могут по-разному реагировать на различные лекарственные препараты.

Серологический анализ в «Семейном докторе»

Серологический анализ крови – базовое исследование в гинекологии и урологии . Используется для диагностики и заболеваний, передающихся половым путём , прежде всего, ВИЧ, сифилиса (), герпеса, цитомегаловируса, токсоплазмоза, а также других заболеваний.

В других отраслях медицины серологический анализ используется для выявления вирусного гепатита (В и C), а также причин миокардитов, болезни легионеров, атипичной , кишечных инфекций.

Серологический анализ используется также и для диагностики аутоиммунных заболеваний. В этом случае антитела вырабатываются к тканям самого организма и исследование позволяет их обнаружить.

Подготовка к серологическим исследованиям

Кровь на серологический анализ сдаётся натощак. Особой подготовки к исследованию не требуется.

Категории

Популярное