Стадии развития паразита. Стадии развития кишечных «веревочных» паразитов

Анализ противомалярийной активности новых соединений следует стандартным процедурам. Однако использование этой модели для животных стало трудным из-за экономических и этических проблем: ограниченного числа обезьян, небольшого числа линий паразитов, приспособленных для заражения приматами и различной патологии, представленной этими моделями 4, 5, 6. Внешние факторы, такие как иммунитет, вариации поглощения и метаболизма наркотиков, снижаются из-за использования в экспериментах еще не подвергнутых воздействию животных признанных штаммов.

Кроме того, потенциальные ошибки классификации повторного заражения не учитываются, поскольку в тестах используется прямая инокуляция паразитов в фазе крови в хорошо охраняемых районах вблизи плена. После этого ингибирование созревания паразита контролируется для оценки дозозависимого эффекта препарата, предотвращая развитие паразита от кольца до шизонта. В целом, эти испытания являются трудоемкими и относительно дорогими; однако, внедряются нововведения, которые могут облегчить их адаптацию к рутинной работе на местах и ​​более эффективные инструменты для анализа активности наркотиков.

Процедура анализа и валидации противомалярийных препаратов относительно трудоемка и сложна. Первая фаза оценки препарата обычно состоит из двух подфаз. Его разработка позволила удалить паразита из кровотока пациента и перенести его в высоко контролируемую лабораторную среду. Это также позволило провести исследования в неэндемичных регионах, где нет хорошего количества новых образцов паразитов. С возможностью криоконсервации живых паразитов 12 культуры обеспечивают основу для исследований, требующих высокой плотности паразитов и процедур клонирования.

Такой подход позволяет почти полностью избавиться от вмещающих факторов, связанных с хозяином, таких как его иммунитет и метаболизм по отношению к соединению, что дает прямую оценку воздействия препарата. Подсчет шизонтов через густую каплю. Этот тест на чувствительность к препарату основан на подсчете паразитов после оценки морфологии его роста с помощью световой микроскопии. Это должно выполняться опытными микроскопистами, поскольку они очень трудоемки и восприимчивы к индивидуальным изменениям.

Несколько других предшественников, таких как пальмитат, серин, холин, инозитол и изолейцин, также были указаны для использования в изотопных тестах. 29 Однако стандарты обращения с радиоактивными материалами стали гораздо более ограничительными с целью ограничения их использования для где нет альтернативной методологии. Другим ограничением является высокая стоимость необходимого оборудования, такого как жидкостные сцинтилляционные счетчики и уборочное оборудование. Кроме того, относительно высокие плотности паразитов, необходимые для этого испытания, ограничивают его применимость к использованию штаммов паразитов, адаптированных к культурам, или к полевым образцам с высокой паразитемией.

Эти барьеры делают их рутинное использование более дорогостоящим и сложным в контексте исследований и клинической помощи, особенно в условиях ограниченного ресурса. Количественная оценка белков паразита. Оценка воздействия созревания ооцисты может быть установлена ​​путем наблюдения стадии развития ооцисты. Развитие ооцист также можно количественно определить путем измерения диаметра ооцисты с помощью окулярного микрометра.

Печеночная фаза представляет собой переходную фазу между внеклеточным спорозоитом, инокулированным вектором комаров и фазой крови, которая отвечает за продуцирование заболевания. Хотя фазы печени являются привлекательными мишенями для противомалярийной химиотерапии, роль эффективных и широко доступных препаратов по-прежнему ограничена.

Снизилось выявление новых лекарств из-за отсутствия чувствительного и надежного метода, который может использоваться при крупномасштабном скрининге. Несмотря на значительные успехи, экзоэритроцитарные фазы малярийных паразитов у млекопитающих остаются наименее понятными из всех фаз жизненного цикла паразита. Некоторые лаборатории пытались использовать первичные гепатоциты из естественных и лабораторно восприимчивых хозяев 113. Первичные гепатоциты имеют то преимущество, что их можно получить у гистосовместимых животных с экспериментально иммунизированными хозяевами.

Кроме того, они позволяют тестировать препараты, требующие метаболической активации, хотя обычно наблюдаются качественные и количественные различия между видами в метаболических путях препаратов печени. Однако первичные гепатоциты также имеют некоторые существенные недостатки: метаболический профиль гепатоцита изменяется в течение времени культивирования; плотность паразитов, полученных с использованием таких клеток, относительно невелика; по техническим причинам препарат варьируется от эксперимента до эксперимента и в соответствии с каждой лабораторией; и препарат варьируется в зависимости от состояния питания и других характеристик хозяина.

Однако в исследованиях чувствительности к лекарственным средствам линии клеток гепатомы могут не точно воспроизводить метаболизм препарата первичными гепатоцитами. Чтобы получить более полную картину активности отдельных лекарств, можно использовать несколько различных систем культуры.

Эти методы подвержены большим различиям между наблюдателями и требуют значительного времени, учитывая низкую степень инфицирования, наблюдаемую в гепатоцитах из культур 125. Эта стратегия представляет собой воспроизводимую систему, в которой клонированный паразит развивается до зрелости в данной клетке-хозяине с той же скоростью и с той же морфологией, что и в подходящем лабораторном хозяине. Обилие существующих и доступных тестов на чувствительность к наркотикам делает исследователя перед лицом трудного выбора.

Однако оба теста несут важные препятствия. Они чувствительны, относительно просты и быстры, не требуют использования специализированного оборудования и могут заменить традиционные тесты. Тем не менее, они все еще далеки от использования измерительного щупа для дозировки лекарственной устойчивости. По мере появления новых знаний о генетике резистентности к лекарственным средствам, и по мере разработки новых и улучшенных инструментов молекулярные методы могут оказаться чрезвычайно ценными инструментами для наблюдения и раннего выявления противомалярийной лекарственной устойчивости в будущем.

Тестирование на наркотики является центральным в исследованиях малярии и всегда должно дополняться клиническими исследованиями, генетическими исследованиями хозяев, связанными с метаболизмом лекарственных средств, молекулярными маркерами для более быстрого выявления наличия резистентности в поле и новых диагностических методов, применяемых в основном характеристика восприимчивости препарата.

Авторы хотели бы отметить ценный вклад доктора. Тяжелая малярийная анемия низкой нагрузки паразита в моделях грызунов обусловлена ​​ускоренным очисткой неинфицированных эритроцитов. Модели мышей для малярии эритроцитарной стадии. Церебральная малярия: исследования человека и мыши.

Профилирование генома малярии: обзор генов трех видов малярийного паразита с сопоставлением с другими видами апикомплексан. Рональд Росс: маляролог и полимат. Человеческие паразиты малярии в непрерывной культуре. Лекарственная малярия: возникновение, контроль и наблюдение.

Простая и недорогая методика флуоресценции для скрининга антималярийного препарата с высокой пропускной способностью. Поиск новых противомалярийных препаратов среди известных лекарств. Богатый гистидином тест на чувствительность к малярии на основе белка 2 для полевого использования.

Тестирование лекарственной чувствительности к малярии. Простой богатый гистидином белок 2 сэндвич-иммуноферментным анализом с использованием сэндвича с белками для использования при тестировании чувствительности к лекарственным препаратам малярии. Параллельный синтез и противомалярийный скрининг библиотеки 4-аминохинолина.

Вторичные печеночные шизонты при спонтанной малярии у грызунов. Проточный цитометрический скрининг образцов крови для паразитов малярии. Малярийные паразиты орангутанов. Обнаружение противомалярийных лекарств: модели эффективности скрининга соединений.

Гуманизированные мыши для моделирования инфекционных заболеваний человека: проблемы, прогресс и перспективы. Изобилие, кусающее поведение и пассивный уровень анофиновых видов комаров в связи с заболеваемостью малярией в золотодобывающих районах южной Венесуэлы.

Скрининг лекарственных растений с острова Реюньон для противомалярийной и цитотоксической активности. Идентификация новых противомалярийных препаратов методом линейного дискриминантного анализа и топологического виртуального скрининга. Тысячи химических исходных точек для идентификации противомалярийного свинца.

Быстрый и простой метод количественного определения выделения лактатдегидрогеназы при измерениях клеточной цитотоксичности и активности фактора некроза опухолей. Новый колориметрический анализ цитотоксичности для скрининга противораковых препаратов. Нейтральный красный анализ жизнеспособности клеток и цитотоксичности, вызванной ксенобиозом, в первичных культурах гепатоцитов человека и крысы.

Адаптация быстрого автоматизированного анализа на основе тетразолиевой краски для теста на хемочувствительность в детском лейкозе. Обширная лекарственная устойчивость при малярии и туберкулезе. Преимущества комбинированной терапии артемизинином для малярии простираются за пределы индивидуального пациента.

Влияние производных артемизинина на трансмиссивность малярии. Мы уже теряем комбинированную терапию артемизинином? Белки половых стадий паразита малярии: выражение, функция и потенциал для стратегий блокирования передачи. Идентификация ксантуреновой кислоты как предполагаемого индуктора развития малярии у комаров.

Кальций и зависимая от кальция протеинкиназа регулируют формирование гамет и передачу москитов у паразита малярии. Безопасность и эффективность метиленового синего в сочетании с артесунатом или амодиакином для неосложненной малярии малярии: рандомизированное контролируемое исследование из Буркина-Фасо.